引起小鼠ELISA檢測試劑盒測定結(jié)果錯(cuò)誤的原因

　　引起小鼠ELISA檢測試劑盒測定結(jié)果錯(cuò)誤的原因
　　
　　小鼠ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理方法：
　　
　　1、血清-----室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心
　　
　　2、血漿-----應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心
　　
　　3、細(xì)胞培養(yǎng)上清---檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清
　　
　　4、組織標(biāo)本-----切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用
　　
　　5、培養(yǎng)細(xì)胞-----檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
　　
　　小鼠ELISA檢測試劑盒常見問題解析：
　　
　　1.加樣量不一致？
　　
　　解決方法：樣品稀釋前應(yīng)充分混勻，盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。
　　
　　2.樣品數(shù)量多少不一，加樣時(shí)間有長有短？
　　
　　解決方法：重復(fù)某一樣品時(shí)，加樣時(shí)間盡可能與*次接近。
　　
　　3.保溫時(shí)間不一致，洗滌條件不一致，操作人員不一致？
　　
　　解決方法：重復(fù)測定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性。
　　
　　ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：①標(biāo)本因素；②試劑因素；③操作因素。