ELISA“花板”---看過之后，您再也不用擔(dān)心了

在ELISA實(shí)驗(yàn)過程中時(shí)常會(huì)出現(xiàn)我們時(shí)常說的"花板"現(xiàn)象，這種現(xiàn)象影響檢驗(yàn)結(jié)果的正確判讀，對(duì)工作造成一定的不利影響。

一旦出現(xiàn)“花板”，實(shí)驗(yàn)結(jié)果必須放棄，不僅浪費(fèi)物料和時(shí)間，而且還會(huì)出現(xiàn)樣本量缺少、交叉污染、報(bào)告延遲等一系列問題。?

所謂“花板”，就是空白、陰性、陽性對(duì)照及室內(nèi)質(zhì)控孔結(jié)果正常，而標(biāo)本孔的OD值卻偏高，弱陽性結(jié)果較多?

“花板”現(xiàn)象的出現(xiàn)，往往會(huì)給實(shí)驗(yàn)者判讀結(jié)果帶來麻煩。仁捷生物對(duì)“花板”現(xiàn)象進(jìn)行了分析和總結(jié)，認(rèn)為花板原因大多在樣品，解決辦法主要在洗滌，孵育和顯色過程也會(huì)導(dǎo)致。

 花板原因大多在樣品

“花板之所以空白、對(duì)照及質(zhì)控結(jié)果正常而標(biāo)本孔異常，是因?yàn)闃悠繁旧淼脑?，大部分或全部?biāo)本孔的OD值偏高，很可能是因?yàn)闃悠分心承┕灿械奈镔|(zhì)非特異性的吸附于固相載體，而在實(shí)驗(yàn)的過程中未被除去。 

待測(cè)血清中混有紅細(xì)胞或纖維蛋白原 這兩種物質(zhì)易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈。實(shí)驗(yàn)中，在較高的離心轉(zhuǎn)速（3000 /min）和較長(zhǎng)的離心時(shí)間（>10 min）之下，血液標(biāo)本被充分地離心分離之后，使紅細(xì)胞和纖維蛋白充分沉淀，可以在加樣時(shí)避免加入紅細(xì)胞和纖維蛋白，避免這兩種干擾物質(zhì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，就可避免“花板”情況。 

 解決辦法主要在洗滌

聚苯乙烯因其具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能而被廣泛用于ELISA實(shí)驗(yàn)的固相載體，聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，因此需要通過洗滌清除在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。洗滌在ELISA過程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。

血清中存在紅細(xì)胞或纖維蛋白原，可以在加樣前離心時(shí)得到控制，同樣也可以通過適當(dāng)增加洗滌次數(shù)和浸泡時(shí)間減輕或避免對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。同樣，對(duì)于血液存在的非特異性的IgG很難在加樣時(shí)將其去除，那么解決的Z佳時(shí)機(jī)就是洗滌過程。 

在ELISA實(shí)驗(yàn)過程中時(shí)常會(huì)出現(xiàn)我們時(shí)常說的"花板"現(xiàn)象，這種現(xiàn)象影響檢驗(yàn)結(jié)果的正確判讀，對(duì)工作造成一定的不利影響。

一旦出現(xiàn)“花板”，實(shí)驗(yàn)結(jié)果必須放棄，不僅浪費(fèi)物料和時(shí)間，而且還會(huì)出現(xiàn)樣本量缺少、交叉污染、報(bào)告延遲等一系列問題。

所謂“花板”，就是空白、陰性、陽性對(duì)照及室內(nèi)質(zhì)控孔結(jié)果正常，而標(biāo)本孔的OD值卻偏高，弱陽性結(jié)果較多。

“花板”現(xiàn)象的出現(xiàn)，往往會(huì)給實(shí)驗(yàn)者判讀結(jié)果帶來麻煩。仁捷生物對(duì)“花板”現(xiàn)象進(jìn)行了分析和總結(jié)，認(rèn)為花板原因大多在樣品，解決辦法主要在洗滌，孵育和顯色過程也會(huì)導(dǎo)致。

 花板原因大多在樣品
“花板之所以空白、對(duì)照及質(zhì)控結(jié)果正常而標(biāo)本孔異常，是因?yàn)闃悠繁旧淼脑?，大部分或全部?biāo)本孔的OD值偏高，很可能是因?yàn)闃悠分心承┕灿械奈镔|(zhì)非特異性的吸附于固相載體，而在實(shí)驗(yàn)的過程中未被除去。 

待測(cè)血清中混有紅細(xì)胞或纖維蛋白原 這兩種物質(zhì)易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈。實(shí)驗(yàn)中，在較高的離心轉(zhuǎn)速（3000 /min）和較長(zhǎng)的離心時(shí)間（>10 min）之下，血液標(biāo)本被充分地離心分離之后，使紅細(xì)胞和纖維蛋白充分沉淀，可以在加樣時(shí)避免加入紅細(xì)胞和纖維蛋白，避免這兩種干擾物質(zhì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，就可避免“花板”情況。 

 解決辦法主要在洗滌
聚苯乙烯因其具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能而被廣泛用于ELISA實(shí)驗(yàn)的固相載體，聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，因此需要通過洗滌清除在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。洗滌在ELISA過程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。

血清中存在紅細(xì)胞或纖維蛋白原，可以在加樣前離心時(shí)得到控制，同樣也可以通過適當(dāng)增加洗滌次數(shù)和浸泡時(shí)間減輕或避免對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。同樣，對(duì)于血液存在的非特異性的IgG很難在加樣時(shí)將其去除，那么解決的Z佳時(shí)機(jī)就是洗滌過程。