ELISA 實(shí)驗(yàn)中給檢測(cè)樣本加樣的步驟詳解

1. 細(xì)胞上清：前處理必須是細(xì)胞離心去除，每孔直接加 100μl 即可。如果濃度太高需稀釋時(shí)，用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋。

2. 腦脊液：前處理必須是細(xì)胞離心去除，每孔直接加 100μl 即可。如果濃度太高需稀釋時(shí)，用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋。

3. 血清血漿：加入 50 ul 樣本分析緩沖液后加 50 ul 標(biāo)本, 如稀釋量大，請(qǐng)將樣本與樣本分析緩沖液等量加入，不足部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)充至 100ul。

• ① 血清標(biāo)本應(yīng)是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液；
• ② 血漿標(biāo)本，推薦用 EDTA 的方法收集若待測(cè)樣本不能及時(shí)檢測(cè)，標(biāo)本收集后請(qǐng)分裝，凍存于－20℃，避免反復(fù)凍融。
• ③ 血清標(biāo)本不應(yīng)添加任何防腐劑或抗凝劑；
• ④ 標(biāo)本應(yīng)清澈透明，檢測(cè)前樣本中如有懸浮物應(yīng)通過(guò)離心去除。
• ⑤ 請(qǐng)勿使用溶血，高血脂或污染的標(biāo)本檢測(cè)，否則結(jié)果將不準(zhǔn)確。

4. 組織勻漿液的樣本：要制備過(guò)程中需要在緩沖液中加入蛋白酶抑制劑，防止蛋白成份被內(nèi)源性蛋白酶降解，造成檢測(cè)結(jié)果的值偏低。因組織勻漿液的樣本蛋白種類多，含量豐富，實(shí)驗(yàn)參照血清血漿標(biāo)本的處理方法進(jìn)行，否則就會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。具體是加入 50 ul 樣本分析緩沖液后加 50 ul 標(biāo)本，需稀釋時(shí)，請(qǐng)將樣本與樣本分析緩沖液等量加入，不足部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)充至 100ul。